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AbFlex® His-Tag antibody (rAb) AbFlex® His-标签抗体 (rAb)91183/91184
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    Active Motif

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重组抗体会成为未来科研抗体的主力军吗?

3160 人阅读发布时间:2019-12-23 11:52

一支稳定的高特异性的抗体,永远是获得真实可重复的实验结果的先提条件。每年因为抗体问题,全球在生物研发和生产上要遭受8亿美元的损失。早在1994年,《比较神经学》(the Journal of Comparative Neurology)的主编Clifford Saper就发现使用"错误"的抗体会产生误导性结果,进而要求投稿者提供抗体验证的信息,并最终形成了JCN Antibody Database。

当今,抗体生产商提供的抗体验证信息及学术文章中抗体的应用验证,都尽可能的为抗体的选择提供更多的评判标准。但有一个问题仍然无法避免:无论是通过动物血清提取的多克隆抗体,还是通过杂交瘤生产的单抗,都或多或少的存在批次间的差异。经过多种应用验证的特定批次的商品化抗体,在一段时间后就不可避免从厂商的产品单上消失,而新批次的抗体的验证又意味着新的人力物力与时间的消耗。商品化的重组抗体或许可以最终解决这一问题。

那什么是重组抗体呢?它的优势还有哪些呢?

抗体对抗原的特异性识别是由抗体的可变区决定的,特别是可变区中的互补决定区。将高特异性单抗的互补决定区基因序列克隆到通用的IgG骨架结构序列中并在动物细胞中稳定表达,就可获得具有抗原识别特异性的重组抗体。
以Active Motif的AbFlex®重组抗体为例,其不仅保存了母本单抗的高特异性和高亲和性,同时从根本上消除了抗体的批次间差异,并且能够灵活选择抗体标记物及纯化方式。

新闻图片1
图1 AbFlex®重组抗体结构


重组抗体可以根据需求改造重链的C末端。如在AbFlex®重组抗体重链的C末端有两个6X-His标签, 可用于镍柱纯化或anti-His抗体识别。C末端“中间”的位置上有2个亲和素(Avidin)标签,通过生物素连接酶如BirA,重组抗体C末端最多可结合两个生物素,可用于ELISA实验,或与链霉亲和素包被的平板及磁珠/琼脂糖珠结合。AbFlex®重组抗体的C末端“上部”还开创性地设置了一个转肽酶(Sortase)A识别位点,利用Active Motif 的Sortag-IT Labeling Kit,可通过转肽反应共价结合含有多聚甘氨酸(G)n的抗体标记物,如酶(HRP等),蛋白,荧光基团,生物素,DNA等等。

新闻图片2
图2 重组抗体的标记与ELISA实验优势


与常规的抗体相比,AbFlex®重组抗体的C末端标记拥有很多优势:
1. 可以不使用二抗,避免二抗种属的限制
2. 多种标记物选择,可根据需要自行添加抗体标记物
3. 不会产生过度标记的状况,每个抗体最多携带两个标记物
4. 定向标记,标记物位于C末端,不干扰对抗原的识别,不产生空间位阻

对含有相同互补识别区的母本抗体和AbFlex®重组抗体进行ELISA实验检测,重组抗体的灵敏度要比化学标记的母本抗体高50倍以上。

新闻图片3
图3 AbFlex®重组抗体与含有相同互补识别区的母本抗体灵敏度比较


就目前来看,应用于科研的重组抗体的种类还远不及传统多抗和单抗广泛,但其包括稳定性在内的众多优点,在不久的未来或将使重组抗体成为科研抗体应用中的主力军。

更多AbFlex®重组抗体信息请见Active Motive网页:
AbFlex®抗体

同时Active Motive 还提供重组抗体服务
咨询电话:021-20626090
邮箱:techchina@activemotif.com

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